Fagyasztva tört replika jelölés (SDS-FRL)
Az SDS-FRL az elektronmikroszkópos immunarany lokalizáció egy olyan modern vizsgálati módszere, amelynek kiemelkedően magas az érzékenysége és felbontása a hagyományos beágyazás előtti- és utáni immunlokalizációs technikákhoz viszonyítva. Az eljárással az idegsejtek felszínéről egy kétdimenziós nézet készíthető, amely megkönnyíti a sejtfelszíni területek mérését, illetve az ellenanyagoknak a felismerési reakció során nem kell a szövetbe diffundálniuk, ami a módszert ideálissá teszi kvantitatív analízisekre. A vizsgált membránfehérjét specifikusan jelölő ellenanyagokhoz különböző méretű aranyszemcsék kapcsolhatók, melyekkel különböző membránfehérjék sejtfelszíni eloszlását, különféle szubcelluláris kompartmentekbe történő bedúsulását vizsgálhatjuk nanométeres pontossággal. Az eljárás ideális a szinaptikus fehérjék intra-szinaptikus eloszlásának tanulmányozására.
A legtöbb idegsejt polarizált, egyes kompartmentjei (dendrit, tüske, sejttest, axon iniciális szegmentum, axon terminális, szinapszis) az idegi jelátvitel és információfeldolgozás különféle folyamataiban vehetnek részt. A membránfehérjék neuronális kommunikációban betöltött szerepének megértéséhez ezért elengedhetetlen a sejtfelszíni eloszlásuk és mennyiségük pontos ismerete. Csoportunkban a módszer segítségével sikeresen feltártuk hippokampális piramissejteken egyes G-protein kapcsolt (Kir3.2) vagy feszültségfüggő kálium (Kv1.1, Kv2.1, Kv4.2) és nátrium csatornák (Nav1.6) axo-dendro-szomatikus eloszlását. A módszert sikerrel alkalmaztuk feszültségfüggő kálcium csatornák intraszinaptikus eloszlásának elemzésére a szinaptikus vezikula felszabadulás helyének függvényében.